BDNF - блог доктора Минутко

          Нейротрофический фактор мозга ( BDNF) , как и фактор роста нервов ( ( NGF) , нейротрофин - 3 ( NT - 3) и нейротрофин 4/5 ( NT-4/5)  относят к нейротрофическим факторам, способствующим росту , дифференцировке и выживанию нейронов при развитии, сохранении и пластичности "взрослых " нейронов ( Huang E., Lee C., 2006). Изменения в активности этих факторов приводят к нарушению передаче в синапсе и изменения функции нейронов , которые могут лежать в основе как возникновения , так и прогрессирования психических расстройств,

            BDNF синтезируется в эндоплазматическом ретикулуме в качестве белкового предшественника с молекулярной массой 32 кДа и аминокислотной последовательностью в 249 аминокислотных остатков. Эффекты нейротрофинов проявляют себя при взаимодействии с тирозинкиназными рецепторами - Trk - A, Trk - B, TrK - C.  Нейротрофины взаимодействуют с "универсальным" p75NTR . BDNF предпочтительно взаимодействует с Trk-B или p75NTR, при этом запуская внутриклеточный сигнал , колторый ведет либо к гибели нейрона , либо к его выживанию,

              BDNF способствует развитию ( росту) незрелых нейронов , повышает выживаемость и улучшает функциональную активность зрелых нейронов и поддерживет интернейронные связи через синапсы. Снижения уровня BDNF способствует атрофии клетки и может привести к ее гибели, В эксперементальных исследованиях показана связь BDNF с нейротрансмиттерами , в частности, известно наличие нескольких взаимодействий между BDNF и дофаминергической системой,  BDNF снижает потери тирозингидроксилазы , маркера жолфаминергических нейронов в вентральной части среднего мозга, а также защищает дофаминергические нейроны от нейротоксических агентов ( 6-OHDA и MPP - бета).   BDNF   улучшает выживаемость дофаминергических нейронов в культуре и регулирует высвобождение мРНК рецепторов D1 - и белка и экспрессию D5 - рецептора в развивающихся стриарных астроцитов, В литературе встречаются сообщения о генетической связи между индуцированной антипсихотиками поздней дискинезии и взаимодействием между видами генов BDNF и D5 - рецепторов,

              BDNF свободно проникает через гематоэнцефалический барьер ( PAN W., et.al., 1998). , поэтому уровни нейротрофического фактора роста в сыворотке коррелируют с его концентрацией в центральной нервной системе,  У пациентов с депрессией значительно уменьшается уровень BDNF  в сыворотке крови, причем данное снижение отрицательно коррелирует с результатами шкалы депрессии Монтгомери - Асберга, иными словами зависит от выраженности ( тяжести ) симптомов депрессии. В процессе лечения антидепрессантами этот феномен становится обратимым.

               Ряд исследователей показал, что у пациентов с депрессией сокращается объем гиппокампа и префронтальной коры, Можно предполагать, что снижение объема лимбических структур мозга при аффективных расстройствах обусловлено снижением трофической поддержки, Экспрессия BDNF уменьшается у больных с депрессией , совершивших самоубийство и увеличивается у пациентов, получавших антидепрессанты.  У хронических больных шизофренией отмечается значительное снижение в сыворотке крови BDNF ( Favalli G., et.al., 2012). Однако, в литературе можно встретить и сведения о повышении уровня BDNF у пациентов с шизофренией ( Reis H., et.al., 2008), что может быть обусловлено специфическим влиянием отдельных антипсихотиков на уровень BDNF. Можно отметить, что гиперкортизолемия приводит к снижению уровня BDNF.  Воздействие стресса и глюкокортикоидов уменьшает экспрессию экспрессию BDNF в некоторых областях мозга, включая префронтальную кору,

                Представляют интерес исследования , посвященные половым различиям в уровне BDNF. Депрессия у женщин в большей степени характеризуется снижением уровня BDNF в сыворотке крови ( Maзо Г.Э., с соавт., 2015).

               В большинстве случаев уровень BDNF измеряется с помощью тест - системы Rand D systems ELISA ( R&D Systems , USA). , основанной на методе твердофазного иммуноферментного анализа ( ИФА), Эта тест - система содержит рекомбинантный человеческий BDNF , вырабатываемый клетками Sf21 и антитела к рекомбинантному фактору, В основе "тест - системы" лежит метод количественного ИФА типа "сэндвич", На первом этапе стандарты и образцы последовательно вносятся в лунки планшета и присутствующий в них BDNF связывается с антителами. На следующем этапе в лунки планшета последовательно вносятся вторые антитела к BDNF меченные ферментом. Для оценки , связавшихся комплексов "антиген - антитело" используется ферментный субстрат. Интенсивность окраски полученного раствора в лунках пропорциональна количеству BDNF, связавшегося на первом этапе анализа, Полученная цепная реакция останавливается с помощью стоп - реагента.Ю, и далее оптическая плотность окончательного раствора оценивается с помощью микропланшетного фотометра,  Образцы крови необходимо доставлять в лабораторию в течении 30 минут, затем отделяют сыворотку центрифугированием при 3000 оборотов в минуту в течении 15 минут , а затем аликвотируют в пластиковые пробирки однократного применения и хранят при температуре минус 80 гр.С до момента исследования, При постановке анализа размороженные образцы разводят в 20 раз специальным разбавителем калибратора, предлагаемым производителем тест - системы. ( RD6P). Для стабилизации реагентов перед началом постановки их оставляют при прикомнатной температуре на 30 мин. Проведение исследований с пробами пациентов предусматривает построение калибровочной кривой , для чего лиофилизированный стандарт разводят по определенной схеме , где исходное значение BDNF соотвествует 4000 пг/мл, самое низкое - 62,5 пг/мл. Этапы инкубации стрипов проводят при комнатной температуре ( 25 гр.С) на рабочем столе, промывку лунок с помощью автоматического промывающего устройства ELх50. ( фирма "Biotek"), оценку оптической плотности лунок ведут при 450 нм с помощью микропланшетного фотометра XLx800 с длинной измерения 450 нми фильтром сравнения 570 нм. При обсчете оптических результатов расчитывают среднее значение оптической плотности дублей, Строят каллибровочную кривую , откладывая по оси Y - среднее значение оптической плотности стандартов, а по оси X - их концентрацию. Построение калибровочной кривой осуществляется с помощью программы Labtronix со специальным программным обеспечением при рекомендации использовать 4 - параметрическую калибровочную кривую. При оценке концентрации BDNF учитывают фактор разведения , в связи с чем концентрацию , полученную по калибровочной кривой , умножают на фактор разведения образца,

Категория сообщения в блог: 

Добавить отзыв