Тромбоциты представляют собой небольшие циркулирующие фрагементы клеток, которые образуются из мегакариоцитов в основном в костном мозге. В физиологических условиях тромбоциты имеют короткую продолжительность жизни в кровообращении, поскольку они выводятся из селезенки и печени через 7–10 дней. В состоянии покоя эндотелий сосудов постоянно предотвращает адгезию и активацию тромбоцитов за счет высвобождения простациклина I2 и оксида азота.
Повреждение кровеносных сосудов или отслоение эндотелия при повреждении приводит к обнажению прокоагулянтного субэндотелиального матрикса и связанных периваскулярных клеток, которые способствуют активации тромбоцитов и свертыванию крови. Однако, адгезия и коагуляция тромбоцитов также может быть инициирована без денудации слоя эндотелиальных клеток. Различные стимулирующие агенты, такие как тромбин, гистамин, фактор некроза опухоли (TNF-α) или лиганд CD40 (CD40L, CD154), превращают эндотелий в провоспалительную и прокоагуляционную поверхность посредством высвобождения фактора Виллебранда (VWF). Секретируемый VWF иммобилизируется на просветном участке эндотелиальных клеток, где он активируется растяжением, опосредованным потоком крови. Эти волокна VWF могут быстро взаимодействовать с GPIb-IX-V на тромбоцитах, что приводит к образованию нитей VWF на тромбоцитах. Прикрепленные тромбоциты транслоцируют GPIIb / IIIb на их поверхность, чтобы стабилизировать их взаимодействие с VWF. Более того, эти прокоагулянтные тромбоциты обнажают фосфатидилсерин (PS) на своей мембране. Вместе с тканевым фактором и фактором VII, PS инициирует активацию факторов свертывания X (FX) и II (FII, протромбин). Присутствие тканевого фактора на тромбоциты , является спорной темой. Тем не менее, более поздние исследования предполагают его экспрессию и поверхностное воздействие при активации. Помимо тканевого фактора, тромбоциты могут усиливать гемостаз посредством презентации P-селектина (CD62P) и лизосомально-ассоциированного мембранного белка 1 и высвобождения FV, гистамина и ADP.
Наряду с вкладом тромбоцитов в гемостаз растет количество фактических данных, указывающих на действие тромбоцитов при воспалении и иммунных реакциях. Более того, последние данные указывают на значительное участие тромбоцитов в патогенезе аутоиммунных заболеваний.
После активации тромбоциты выделяют микрочастицы и высвобождают мощные иммуномодуляторы, хранящиеся в их гранулах, в том числе провоспалительные цитокины и хемокины (например, IL-1ß, TGF-β, PF4 и PDGF). Тромбоциты также способны представлять ряд адгезий (например, GPIb-IX-V и P-селектин) и иммунных рецепторов (например, рецепторы типа toll-like или Fc) для быстрого ответа на внешнюю среду. Эти рецепторы позволяют тромбоцитам взаимодействовать с активированными эндотелиальными клетками сосудов и иммунными клетками, такими как нейтрофилы, моноциты и лимфоциты. В зависимости от контекста эти взаимодействия могут настраивать гемостатические и иммунные реакции, включая активацию системы комплемента.
Существует три типа гранул тромбоцитов: α-гранула, плотная гранула и лизомальная гранула. При стимуляции тромбоцитов гранулы быстро секретируют свое содержимое во внеклеточное пространство. Наиболее многочисленными (40–80% на тромбоциты) и самыми крупными гранулами тромбоцитов (200–400 нм) являются α-гранулы. Они хранят почти 300 различных белков, включая хемокины, цитокины, факторы роста и рецепторы адгезии. Тем не менее, следует отметить, что выброс этих биологически активных веществ не является случайным, а зависит от стимула. Последние наблюдения показывают, что тромбоциты содержат различные субпопуляции α-гранул, которые облегчают дифференциальное высвобождение специфических компонентов α-гранул во время активации тромбоцитов. Эти продукты секреции не только способствуют гемостазу и тромбозу, но также играют потенциальную роль в качестве иммунного посредника, усиливая воспалительные реакции. О некоторых молекулах, полученных из α-гранул, часто сообщают в контексте кожных аутоиммунных заболеваний, таких как факторы комплемента, CD40L, фактор тромбоцитов 4 (PF4, также известный как CXCL4) и P-селектин.
Комплемент представляет собой сложную врожденную иммунную систему для защиты от патогенов. Дисрегуляция комплемента опосредует чрезмерное воспаление и повреждение тканей. Интересно, что α-гранулы тромбоцитов содержат широкий спектр молекул комплемента. Например, тромбоциты хранят C3, C4 и фактор D, которые являются важными компонентами каскадов комплемента. Также ингибитор комплемента, ослабляющий факторы C1, CD55 и CD59 секретируется при активации тромбоцитов.
CD40L является трансмембранным белком суперсемейства TNF. В спокойных условиях CD40L хранится в α-грануле, тогда как он подвергается воздействию на поверхности во время активации тромбоцитов. После выделения CD40L может высвобождаться в виде растворимого белка (sCD40L) с цитокин-подобной активностью. CD40L взаимодействует с CD40 на дендритных клетках (DC), B-клетках и T-клетках, вызывая созревание DC , активацию T-клеток , переключение изотипа B-клеток и выработку антител. Это свидетельствует о значительной роли оси CD40-CD40L в регуляции врожденных и адаптивных иммунных реакций. Также было показано, что полученный из тромбоцитов CD40L индуцирует экспрессию тканевого фактора в моноцитах, что способствует активации внешнего каскада коагуляции. Кроме того, CD40L тромбоцитов может связываться с CD40 на эндотелиальных клетках, вызывая активацию секреции молекул адгезии (E-селектин, VCAM-1 и ICAM-1), хемокинов (IL-8 и CCL2), и выпуск VWF. Таким образом, передача сигналов CD40-CD40L дополнительно способствует адгезии и экстравазации лейкоцитов в месте активации тромбоцитов. Интересно, что конститутивная экспрессия CD40 на поверхности тромбоцитов может дополнительно опосредовать экспрессию CD62P тромбоцитов и высвобождение гранул после восприятия CD40L .
PF4 является одним из наиболее распространенных цитокинов в α-гранулах и является мощным антиангиогенным хемокином. Кроме того, PF4 индуцирует высвобождение провоспалительных цитокинов из лейкоцитов и способствует хемотаксису нейтрофилов. α-гранулы содержат также P-селектин в гликозилированном трансмембранном белке, распознающий углеводные фрагменты, сравнимые с лектинами С-типа. Подобно CD40L, P-селектин транслоцируется во время активации тромбоцитов на поверхностную мембрану или секретируется в плазму в виде растворимого P-селектина (sP-селектина).P-селектин является ключевой молекулой адгезии, поддерживающей тесное взаимодействие с другими иммунными клетками . P-селектин-лиганд-1 (PSGL-1) является основным рецептором для P-селектина, и он экспрессируется главным образом на нейтрофилах и моноцитах. Сшивание между P-селектином и его соответствующим лигандом PSGL-1 играет ключевую роль в образовании агрегатов тромбоцитов и лейкоцитов и в повышении регуляции экспрессии тканевого фактора на моноцитах. Тромбоциты, стимулированные P-селектином-PSGL-1, могут дополнительно активировать нейтрофилы с образованием нейтрофильных внеклеточных "ловушек" (NET). Тем не менее, влияние P-селектина на формирование NET остается спорным. Результаты, представленные рядом исследователей показывают, что P-селектин необходим для генерации NET. NET наоборот, усиливает свертывание крови путем прямого взаимодействия с VWF и активации тромбоцитов. Кроме того, тромбоциты, которые связаны с эндотелиальными клетками, действуют как мост, способствующий адгезии нейтрофилов на стенке кровеносного сосуда через P-селектин.
Плотные гранулы, меньшие и менее обильные, чем α-гранулы, хранят небольшие небелковые молекулы, такие как АДФ, АТФ, серотонин (5-НТ) и кальций. Секреция плотных гранул тромбоцитов играет основную роль в усилении реакции тромбоцитов и тромбозе. Как агонист тромбоцитов, серотонин может модулировать аутокринную и паракринную агрегацию тромбоцитов посредством взаимодействия рецептора серотонина на тромбоцитах. В соответствии с этим сообщалось о различных иммуномодулирующих функциях серотонина, включая привлечение нейтрофилов к месту воспаления, стимуляцию секреции хемокинов моноцитами и пролиферацию Т-клеток.
Параллельно активированные тромбоциты высвобождают микрочастицы путем выделения плазматической мембраны. PMP имеют диаметры в диапазоне от 0,1 до 1 мкм, которые отмечены выражением поверхности CD41 . Хотя различные клеточные линии способны высвобождать мембранные микрочастицы, PMPs составляют основной источник в кровообращении человека . Различные компоненты тромбоцитов представлены в PMP, включая транскрипционные факторы, цитокины, факторы роста, липидные медиаторы, нуклеиновые кислоты, липидные медиаторы и митохондрии . Из-за размера PMP было показано, что PMP избирательно проникают в ткани и доставляют эти биологически активные факторы в клетки-реципиенты, вызывая воспаление и тромбоз . Например, PMP доставляют CD40L к В-клеткам, вызывая эффективный ответ В-клеток и выработку антител. Подобно активированным тромбоцитам, PMP несут отрицательно заряженный PS и, возможно, TF на своей поверхности, что поддерживает коагуляцию посредством активации FX и протромбина. Кроме того, PMP обладают способностью непосредственно связываться с фибрином и усиливать локальную выработку тромбина, что дополнительно усиливает образование тромба.
Тромбоциты имеют множество поверхностных рецепторов, и большинство этих рецепторов запускают либо активацию тромбоцитов, либо адгезию тромбоцитов. Например, гликопротеиновый комплекс тромбоцитов GPIb-IX-V обеспечивает связывание тромбоцитов с субэндотелиальным и просветным VWF даже в условиях высокого сдвига напряжения. Это взаимодействие дополнительно усиливается коллагеном или фибриногеном через рецепторы тромбоцитов GPVI и интегрин α 2 β 1 или интегрин αIIbβ3 соответственно.
Передача сигналов через P2Y 1 обеспечивает активацию PKC, высвобождение Ca 2+ в цитоплазму и вызывает изменение формы
Классические гемостатические агонисты (тромбин и АДФ) не только опосредуют гемостаз, но также напрямую связаны с опосредованными воспалительными рецепторами сигнальными путями. Активированные G aq- протеазой рецепторы PAR1 и PAR4 являются двумя основными рецепторами тромбина на тромбоцитах. Передача сигналов через эти рецепторы стимулирует Rho-ассоциированную протеинкиназу и фосфолипазу Cβ, что приводит к дальнейшей активации протеинкиназы C (PKC) и высвобождению Ca2+. ADP является другим мощным активатором тромбоцитов и может секретироваться из плотных гранул при активации тромбоцитов. На мембране тромбоцитов два пуринергических рецептора P2Y 1 и P2Y 12 выражаются связью с Gqα и Giα соответственно.
Передача сигналов через P2Y 1 обеспечивает активацию PKC, высвобождение Ca 2+ в цитоплазму и вызывает изменение формы
тромбоцитов.
P2Y 12 стимулирует активацию фосфоинозитид-3-киназ, которая запускает секрецию и агрегацию гранул тромбоцитов.
Интересно, что передача сигналов PAR способствует также высвобождению ADP , связывая эти два пути и обеспечивая активацию аутокринных тромбоцитов. Клопидогрель, широко используемый препарат для предотвращения сердечно- сосудистых заболеваний и инсульта, блокирует P2Y 12 на тромбоцитах, что объясняет его высокую эффективность.
Тромбоциты могут также непосредственно распознавать иммуноглобулины и иммунные комплексы (IC) через Fc-рецептор FcγRIIA . Связывание IC с FcγRIIA индуцирует гиперчувствительность тромбоцитов к стимулам тромбина. Кроме того, активация FcγRIIA также может поддерживать высвобождение серотонина тромбоцитами .
Toll-подобные рецепторы (TLR) представляют собой другую группу иммунорецепторов, экспрессируемых на тромбоцитах, которые позволяют тромбоцитам распознавать связанные с эндогенным повреждением молекулярные структуры (DAMP) и патоген-ассоциированные молекулярные структуры. TLR4 является наиболее широко экспрессируемым TLR на тромбоцитах, и он может обнаруживать лиганды, такие как липополисахарид (LPS) и белок группы B1 с высокой подвижностью (HMGB1) . LPS индуцирует связывание тромбоцитов с прилипшими нейтрофилами, что приводит к активации нейтрофилов и образованию NET .
Наконец, тромбоциты экспрессируют несколько рецепторов комплемента (CR). Среди них рецепторы C3aR и C5aR распознают сильные провоспалительные эффекторы комплемента C3a и C5a. Эти два рецептора имеют низкие уровни экспрессии на покоящихся тромбоцитах, но их экспрессия увеличивается при воспалительной стимуляции. Примечательно, что P-селектин содержит девять консенсусных доменов, которые являются общими для структурного мотива CRs. Следовательно, помимо своей функции адгезивной молекулы, P-селектин может также опосредовать связывание эффектора комплемента с поверхностью тромбоцитов для поддержки активации комплемента. Кроме того, поверхностная экспрессия рецепторов C1q на тромбоцитах была связана с инициацией классической активации пути комплемента.
Системная красная волчанка
Системная красная волчанка (СКВ) - это хроническое аутоиммунное заболевание, характеризующееся системным воспалением во многих различных органах. СКВ также связана с тромботическими осложнениями и повышенной сердечно-сосудистой заболеваемостью. Широкий спектр исследований патогенеза СКВ фокусируется на формировании аутоантител и индуцированных аутоантителами IC, а также на дисрегуляции функции лимфоцитов и активации системы комплемента. Однако, тромбоциты также играют важную роль в воспалительной активности и иммунном ответе. Все больше данных свидетельствуют о том, что тромбоциты активируются у пациентов с СКВ и способствуют патогенезу СКВ. Кроме того, тромбоцитопения является распространенным гематологическим проявлением при СКВ и связана с тяжелыми нарушениями СКВ, такими как неврологические нарушения и повреждение почек.
В качестве промотора активации комплемента присутствие антифосфолипидных антител (aPLs) часто выявляется у пациентов с тромбоцитопенией. Средний объем тромбоцитов (MPV) широко используется для оценки активации тромбоцитов при различных воспалительных состояниях. Тем не менее, текущая литература по MPV в SLE противоречива, и еще предстоит изучить вопрос о полезности MPV в качестве биомаркера при SLE. На молекулярном уровне сообщалось о продукции тромбоксана, экспрессии P-селекции и высвобождении sCD40L, PMP и β-тромбоглобулина в качестве маркеров активации тромбоцитов. Их уровни повышены у пациентов с СКВ и связаны с повышенным риском развития тромботических событий.
Несколько провоспалительных медиаторов ответственны за активацию тромбоцитов у пациентов с СКВ. Среди них DAMP, такие как HMGB1 или S100A8 / 9, оба обогащенные в крови пациентов с СКВ , могут обладать потенциалом запуска активации тромбоцитов посредством передачи сигналов TLR4. Активация тромбоцитов также обеспечивается распознаванием IC, ассоциированных с IC через рецепторы FcγRIIA. Кроме того, TLR (TLR7, TLR9), экспонированные на поверхности тромбоцитов, связываются с РНК-содержащими IC или нуклеиновой кислотой (ssRNA, dsDNA), способствуя активации тромбоцитов. IC часто образуются aPLs на поверхности тромбоцитов (почти у 40% больных СКВ). Эти IC, связанные с тромбоцитами, могут быть обнаружены системой комплемента, обеспечивающей отложение C4d и образование комплекса мембранной атаки (MAC) на поверхности тромбоцитов.
Как было упомянуто выше, тромбоциты активно участвуют в каскаде комплемента посредством производства нескольких факторов комплемента, включая C1q, C3 и C4. Эти дополнительные факторы в свою очередь усиливают воздействие тромбоцитов на воспаление. Например, MAC стимулирует тромбоциты к высвобождению провоспалительных медиаторов, таких как серотонин, тромбоксан и β-тромбоглобулин, которые хранятся в их гранулах. Фиксация C4d на поверхности тромбоцитов поддерживает агрегацию тромбоцитов и взаимодействие тромбоцитов с моноцитами и эндотелиальными клетками в контексте венозного тромбоза. Тромбоциты, отмеченные C4d, обнаруживаются почти у 20% пациентов с СКВ, что указывает на C4d-положительные тромбоциты в качестве прогностического биомаркера. Известна тесно переплетенная связь между системой комплемента и коагуляцией ( VWF связывается с C1q и что комплексы C1q-VWF вызывают адгезию тромбоцитов в корреляции с часто наблюдаемыми тромботическими событиями у пациентов с СКВ).
Наряду с вовлечением системы комплемента было показано, что IC опосредуют высвобождение серотонина, PMP и IL-1β из тромбоцитов. Высвобожденный серотонин нарушает эндотелиальный барьер при СКВ, способствуя увеличению проницаемости сосудов. Серотонин также оказывает существенное влияние на активацию и пролиферацию Т-клеток посредством взаимодействия с рецептором 5-НТ7 лимфоцитов. Помимо серотонина, у пациентов с СКВ наблюдаются более высокие концентрации PMP. Исследование с участием 60 пациентов с СКВ показывает, что тромбоциты являются основным источником циркулирующих микрочастиц при СКВ. Интересно, что эти PMP представляют собой C1q + и могут образовывать IC с IgG и IgM. Уровни соединений PMP IgM отрицательно коррелируют с тяжестью СКВ. Напротив, уровни IgG + PMPs положительно связаны с активностью СКВ (SLE). Аутоантитела IgM связываются с апоптотическими клетками у пациентов с неактивной СКВ и могут способствовать невоспалительному удалению PMP моноцитами или макрофагами. Однако PMPs-IgG + стимулируют моноциты, способствующие экспрессии и высвобождению провоспалительных цитокинов, таких как IL-1β, TNF-α и IFN-α. Кроме того, IL-1β также может высвобождаться из активированных тромбоцитов. IL-1β индуцирует экспрессию NFκB-управляемых воспалительных генов, таких как IL-6 IL-8 и ICAM-1, в эндотелиальных клетках, что, в свою очередь, опосредует рекрутирование иммунных клеток и иммунотромботические осложнения . Эндотелиальная активация также может быть инициирована непосредственно через полученный из тромбоцитов CD40L . Эта острая активация характеризуется экзоцитозом тела Вейбеля-Палада, высвобождением мультимеров VWF и, таким образом, быстрым рекрутированием других тромбоцитов, что способствует секвестрации циркулирующих моноцитов взаимодействием P-селектин-PSGL-1.
Активированные тромбоциты также способствуют регуляции адаптивных иммунных реакций. Тромбоциты являются основным источником sCD40L в кровообращении , и передача сигналов CD40L через его рецептор CD40 на В-клетках и Т-клетках приводит к синтезу иммуноглобулина IgG и IgM и реакции зародышевого центра. Как сообщают несколько групп, ось CD40 / CD40L способствует созреванию DC и секреции IFNα. IFNα является ключевым цитокином в патогенезе SLE, о чем свидетельствуют повышенные уровни IFNα регулируемых белков PRKRA, IFITM1 и CD69 в тромбоцитах от пациентов с СКВ (SLE). Повышенная регуляция системы IFNα тесно связана с сосудистыми заболеваниями при СКВ.
Системный склероз
Системный склероз (SSc) является аутоиммунным заболеванием, характеризующимся чрезмерным отложением соединительной ткани и фиброзом, васкулопатией и дисрегуляцией иммунной системы. У пациентов, страдающих SSc, наблюдается усиление активации и агрегации тромбоцитов . Чередование реперфузии ишемии, связанное с феноменом Рейно в пальцах, часто является первым проявлением SSc. Ишемия-реперфузионное повреждение способствует повреждению эндотелиальных клеток, что приводит к высвобождению активных форм кислорода (АФК), DAMPs, активации комплемента и воздействию коллагена на кровоток. Эта воспалительная среда стимулирует рекрутирование и активацию тромбоцитов. Подобно SLE, наличие IC, связанной с aPLs, может дополнительно способствовать гиперчувствительности тромбоцитов. В этом контексте в тромбоцитах пациента с SSc было выявлено специфическое увеличение количества неинтегринового рецептора коллагена типа I тромбоцитов. Это может объяснить состояние ускоренной агрегации тромбоцитов пациентов с SSc при воздействии коллагена.
Обширные экспериментальные данные подтверждают мнение о том, что тромбоциты участвуют в фиброзном процессе главным образом путем высвобождения профибротических медиаторов. Считается, что трансформирующий фактор роста (TGF-β) и тромбоцитарные факторы роста (PDGF) являются центральными патогенными профибротическими медиаторами. Активация профиброзного сигнального пути TGF-β уже давно участвует в фиброзных заболеваниях, включая SSc.
Циркулирующие тромбоциты содержат высокие концентрации ( примерно в 40-100 раз выше по сравнению с другими клетками) TGF-бета в их альфа-гранулах и выпускают его быстро после активации. Несколько исследований показали, что TGFβ играет ключевую роль в ремоделировании внеклеточного матрикса посредством контроля синтеза коллагена, а также секреции фибронектина и тромбоспондина-1 . Примечательно, что TGF-β стимулирует продукцию множества вторичных медиаторов из фибробластов, таких как фактор роста соединительной ткани и эндотелин-1, модулируя активацию фиброзной передачи сигналов "вниз по течению". Подобно TGF-β, активированные тромбоциты также могут высвобождать PDGF, который способен стимулировать пролиферацию фибробластов соединительной ткани и увеличивать выработку коллагена. Исследование показало, что PDGF-A повышается в кожной блистерной жидкости пациентов с SSc , а блокада рецепторов PDGF с помощью Crenolanib эффективна в снижении фиброза кожи в доклинических моделях SSc. Кроме того, Nintedanib, ингибитор тирозинкиназы, ингибирует активацию фибробластов SSc, индуцированную PDGF и TGF-β, и предотвращает возникновение заболевания на разных моделях мышей . Как упоминалось выше, тромбоциты являются основным источником серотонина в кровообращении, и профибротическая роль серотонина недавно привлекла к себе значительное внимание. Серотонин может усиливать выработку коллагена в фибробластах через рецептор 5HT-2B, который чрезмерно экспрессируется в коже пациентов с SSc. Тромбоциты в SSc также способствуют фиброзу кожи, потому что они взаимодействуют с дермальными микрососудистыми эндотелиальными клетками, которые индуцируют последующую секрецию профибротических медиаторов, таких как тимусный стромальный лимфопоэтин.
Участие эндотелия у пациентов, страдающих SSc, отражается в повышенном риске сосудистых заболеваний, таких как феномен Рейно, легочная артериальная гипертензия, ишемическая язва из-за повреждения сосудов, почечная и сердечная недостаточность. Было предложено несколько механизмов для объяснения роли тромбоцитов в васкулопатии, связанной с SSc. Экспериментальные данные показали, что полученный из тромбоцитов PF4 может усиливать экспрессию тромбоспондина-1 и стимулировать секрецию эндотелина-1 из эндотелиальных клеток человека, что приводит к воспалительному фенотипу эндотелиальных клеток и повреждению сосудов, связанному с SSc . Подобно СКВ, наличие PMP в крови у пациентов с SSC, особенно связанных с HMGB1, связано с избытком HMGB1, причем последний высвобождаемый из активированных тромбоцитов у пациентов с SSc, поддерживает связанную с аутофагией активацию нейтрофилов в SSc и обязывает их генерировать NET, что приводит к дисфункции эндотелия сосудов. Недавние исследования показывают, что антиангиогенные факторы, такие как VEGF165b, вместе с провоспалительными (CD40L) и профибротическими (TGF-β) факторами, секретируемыми тромбоцитами, могут способствовать прогрессированию повреждения периферических микрососудов и дефектного восстановления сосудов при SSc .
Становится все более очевидным, что тромбоциты действуют как ключевые регуляторы иммунного ответа, участвующего в патогенезе SSc. Большое количество провоспалительных медиаторов либо синтезируется внутри тромбоцитов, либо хранится в гранулах и высвобождается при активации. Полученные из тромбоцитов CCL5, PF4, CXCL5 и лейкотриен-B4 обладают важными свойствами хемоаттрактанта лейкоцитов, привлекая нейтрофилы, моноциты и фибробласты к месту воспаления, что, в свою очередь, усиливает местные воспалительные реакции. Более того, было показано, что PF4-активированные моноциты запускают продукцию ROS и высвобождение прокоагулянта VWF в эндотелиальных клетках. Также P-селектин транслоцируется на мембрану тромбоцитов и образует адгезивный мостик между эндотелиальными клетками и нейтрофилами, моноцитами и Т-клетками, способствуя тем самым образованию гетеротипических агрегатов тромбоцитов-лейкоцитов на поверхности кровеносного сосуда. Активированные тромбоциты экспрессируют и высвобождают sCD40L, на долю которого приходится почти 90% циркулирующего sCD40L . Взаимодействие между sCD40L и CD40 на В-клетках приводит к увеличению продукции имумоглобулинов и пролиферации В-клеток, что подчеркивает замечательную роль тромбоцитов в регуляции адаптивного иммунного ответа. Другим важным связанным с SSc иммунным медиатором является серотонин . Помимо роли в регуляции выработки коллагена, серотонин также усиливает активацию и пролиферацию Т-клеток посредством передачи сигналов рецептора 5-HT7. Некоторые исследования также предполагают иммуномодулирующие свойства серотонина через созревание миелоидных DC и регуляцию продукции провоспалительных медиаторов, таких как IL-6 и TNF-α, из моноцитов
Васкулиты
Васкулит представляет собой группу сложных заболеваний с патологией воспаления стенки кровеносных сосудов . В зависимости от размера вовлеченных сосудов, васкулиты подразделяются на крупные, средние и мелкие сосудистые васкулиты. Патогенез васкулита остается не полностью понятным, и лишь в нескольких исследованиях сообщается о роли тромбоцитов при васкулите крупных сосудов. Представляет интерес фокусировка на ANCA-ассоциированном васкулите мелких сосудов (AAV), которые характеризуются воспалительной клеточной инфильтрацией стенок сосудов малого размера в системах многих органов. AAV также демонстрируют широкий спектр кожных проявлений, включая некроз тканей и разрушение сосудов . Белки, полученные из нейтрофилов, миелопероксидаза и протеиназа 3, являются основными антигенами-мишенями ANCA . Тромбоциты являются первыми респондентами при повреждении сосудов и являются эффекторными клетками воспаления, тесно связанными с активностью васкулита. В соответствии с этим PMP, содержащие провоспалительные цитокины, увеличиваются у пациентов с AAV и должны вызывать острое воспалительное состояние при AAV.
CD40 и CD40L экспрессируются на эндотелиальных клетках, тромбоцитах и эпителиальных клетках, и их передача сигналов опосредует некоторые процессы сосудистого воспаления. Опосредованное sCD40L-CD40 взаимодействие тромбоцитов с эндотелиальными клетками индуцирует выработку цитокинов и факторов роста (таких как IL-1β, TNF-α, IL-2, VEGF) в эндотелиальных клетках и повышает экспрессию белков адгезии эндотелиальных клеток (таких как ICAM- 1, VCAM-1, P-селектин). Это также приводит к привлечению нейтрофилов и лимфоцитов к месту повреждения. sCD40L также усиливает эндотелиальную экспрессию тканевого фактора и способствует эндотелиальной дисфункции посредством генерации АФК. Нейтрофилы являются сильными медиаторами патогенеза AAV. sCD40L также может напрямую активировать нейтрофилы, опосредуя высвобождение АФК и экспрессию антигена макрофагов 1 (CD11b / CD18). Примечательно, что активированные тромбоциты могут стимулировать образование NET путем высвобождения sP-селектина. В свою очередь, чистые волокна могут связывать тромбоциты, поддерживая их агрегацию. Кроме того, компоненты NET, такие как гистоны, могут дополнительно стимулировать активацию тромбоцитов и эндотелиальных клеток . Блокирование нейтрофилов PSGL-1 полностью ингибирует опосредованное активированным тромбоцитами образование NET. Подобно SLE и SSc, развитие васкулита, по крайней мере, частично связано с активностью системы комплемента. Активация альтернативного пути комплемента как в жидкой фазе, так и на поверхности тромбоцитов приводит к отложению MAC на тромбоцитах и генерации воспалительных факторов C3a и C5a. Обе эффекторные молекулы комплемента вызывают экспрессию молекул клеточной адгезии, таких как E-селектин, ICAM-1 и VCAM-1, на эндотелиальных клетках и продукцию цитокинов / хемокинов и родственных рецепторов (таких как VEGFC-R, IL-6R, IL- 18R). Из-за присутствия C3aR и C5aR на поверхности тромбоцитов, C3a и C5a могут также способствовать активации тромбоцитов, поддерживая коагуляцию и воспаление в AAVs . C5a может также запускать высвобождение тканевого фактора, экспрессирующего микрочастицы и АФК, из сенсибилизированных ANCA нейтрофилов.
Фактор ткани, как ключевая часть каскада коагуляции, катализирует генерацию тромбина, что снова указывает на тесную связь между комплементом и системой коагуляции. Тромбин активирует тромбоциты, способствуя дегрануляции тромбоцитов и высвобождению P-селектина. Кроме того, тромбин также может вызывать высвобождение VWF из эндотелия, опосредующего адгезию и агрегацию тромбоцитов, усиливая перекрестные помехи между коагуляцией и врожденной иммунной системой.
Кожные аутоиммунные заболевания
В ограниченном количестве исследований сообщалось о возможном участии тромбоцитов при других аутоиммунных заболеваниях кожи, таких как хронический крапивница (витриго), витилиго, буллезный пемфигоид и псориаз. Ьулезный пемфингоид является распространенным аутоиммунным буллезным заболеванием, характеризующимся аутоантителами, направленными против гемидесмосомных белков (BP180 и BP320) кожи, с последующим образованеим субэпидермального пузыря Исследование показало значительно более высокое количество эозинофилов и значений MPV у пациентов с этой патологией, что указывает на связанную с заболеванием активацию тромбоцитов. Другое исследование обнаружило повышение уровня sP-селектина у пациентов с буллезным пемфигоидом , что предполагает также потенциальную активацию тромбоцитов.
У пациентов с CU оценка MPV как предполагаемого маркера активации тромбоцитов дала противоречивые результаты. Противоречие могло быть вызвано различиями в выборе пациентов, стадии заболевания и наличии расстройств у пациентов (таких как ожирение и диабет) во время взятия лабораторного анализа. В некоторых исследованиях исследовалось внутрикожное введение богатой тромбоцитами плазмы (PRP) пациентам с витилиго .
PRP является аутологичным продуктом, полученным из крови, с обогащенными тромбоцитами и высокой концентрацией факторов роста, секретируемых из α-гранул тромбоцитов. Эти факторы могут стимулировать миграцию меланоцитов и способствовать пролиферации кератиноцитов. Несколько исследовательских групп сообщили, что сочетание лечения PRP с узкополосной ультрафиолетовой фототерапией B или воздействием фракционного CO 2 -лазера приводит к значительному улучшению репигментации и улучшению комплаентности пациентов.
Псориаз - это хроническое аутоиммунное заболевание кожи, для которого характерны красные чешуйчатые бляшки. Некоторые предыдущие исследования показали тесную связь между активацией тромбоцитов и активностью псориаза. In vitro тромбоциты от пациентов с псориазом более чувствительны к тромбину и ADP. В соответствии с этой повышенной чувствительностью у пациентов с псориазом также были повышены плазменные уровни маркеров активации тромбоцитов, таких как β-тромбоглобулин, PF4, PMP и sP-селектин. Другое недавнее исследование оценило 320 пациентов с вульгарным псориазом и обнаружило, что масса тромбоцитов увеличивается у пострадавших пациентов . Интересно, что активация тромбоцитов также была приписана увеличению эндогенного антимикробного кателицидина LL37 у пациентов с псориазом. Исследователи продемонстрировали зависимое от тяжести заболевания взаимодействие между низкой плотностью нейтрофилов и тромбоцитов у пациентов с псориазом.
Заключение
Таким образом, компоненты тромбоцитов и индексы тромбоцитов могут потенциально использоваться для мониторинга и диагностики аутоиммунных заболеваний. При SLE было показано, что сывороточные или плазменные уровни ассоциированных с тромбоцитами молекул, таких как HMGB1, S100A8 / A9, sCD40L и CCL5, а также PMP, полученные из тромбоцитов, несущих IgG, коррелируют с оценкой индекса активности болезни SLE (SLEDAI).
Был разработан ряд низкомолекулярных ингибиторов и моноклональных антител, направленных на активацию тромбоцитов при аутоиммунных заболеваниях кожи. Например, гидроксихлорохин (HCQ) представляет собой противомалярийное соединение, которое обеспечивает эффективное лечение при всех типах красной волчанки. Одним из полезных механизмов терапии HCQ является ингибирование агрегации и дегрануляции тромбоцитов. HCQ-опосредованное ингибирование тромбоцитов также эффективно для лечения SSc.
Другим терапевтическим вариантом для блокирования активации тромбоцитов является использование ингибитора рецептора P2Y12 клопидогрела. В нескольких исследованиях сообщалось, что у мышей, склонных к волчанке, лечение клопидогрелем ингибирует высвобождение тромбоцитарного sCD40L и P-селектина. На моделях мышей SSc было показано, что клопидогрел уменьшает фиброз . Тем не менее, одно исследование показало, что стандартная доза клопидогрела (75 мг) ингибирует активацию тромбоцитов у пациентов с SSc, но не влияет на уровень серотонина в плазме. Обработка клопидогрелем даже привела к значительному увеличению растворимого VCAM-1, указывая на эндотелиальную дисфункцию в качестве неблагоприятного эффекта. Кроме того, фиброз был успешно преодолен на мышиной модели SSc с использованием ингибиторов серотониновых рецепторов тергурида, ципрогептадина и SB 204741.
Дапиролизумаб представляет собой фрагмент Fab-антитела против CD40L и в настоящее время оценивается в фазе 2. Лечение этим препаратом демонстрирует превосходный профиль переносимости и убедительную клиническую эффективность у пациентов с СКВ клинического испытания. Примечательно, что в фазе 1 клинического испытания не было отмечено тромбоэмболических побочных эффектов.
Передача сигналов CD40L также ингибируется статинами, поскольку этот класс низкомолекулярных соединений способен снижать содержание CD40L в тромбоцитах и, следовательно, уровни sCD40L. Следовательно, лечение больных СКВ статинами может снизить тромбоцитарную активность тромбоцитов.
В качестве будущих перспектив, возможно, стоит изучить несколько возможных вариантов лечения, направленных на компоненты тромбоцитов или предотвращение активации тромбоцитов. Например, поскольку P-селектин играет важную роль в патогенезе аутоиммунных заболеваний, Inclacumab, новое моноклональное антитело против P-селектина , может рассматриваться в будущем для лечения кожных аутоиммунных заболеваний.
Как обсуждалось в предыдущем разделе, было установлено, что отложение C4d на тромбоцитах является высокоспецифичным для диагностики SLE, а положительные C4d тромбоциты рассматриваются как фактор риска тромботического события у пациентов с SLE. В соответствии с этим, ингибирование системы комплемента с помощью Еculizumab, моноклонального антитела, нейтрализующего С5, предотвращало тромботическую микроангиопатию при СКВ. Следовательно, было бы весьма интересно дополнительно исследовать эффекты воздействия нейтрализующих антител C4 или разработать специфические соединения, предотвращающие отложение C4d на поверхности тромбоцитов.
Активация тромбоцитов контролируется множеством различных путей, и лучшее понимание этих сигнальных путей может открыть новые терапевтические перспективы. Например, коллаген запускает фосфорилирование тирозинкиназы Брутона (BTK), а преобразователь сигнала и активатор транскрипции 3 (STAT3) могут модулировать агрегацию и активацию тромбоцитов . Сообщалось, что ингибитор BTK RN486 отменяет образование PMP , а ингибитор STAT3 SC99 был эффективен для ингибирования индуцированной тромбином экспрессии P-селектина и активации тромбоцитов. Кроме того, активированные тромбоциты являются основным источником sCD40L, и блокада взаимодействия CD40-CD40L моноклональными антителами, по-видимому, является перспективным методом лечения аутоиммунных заболеваний. Помимо антител против CD40L, недавно был сконструирован пептид, нацеленный на CD40. Этот пептид имитирует домен CD40L, критический для взаимодействия с CD40, и было показано, что он эффективно блокирует передачу сигналов CD40-CD40L .
Тромбоциты являются основными участниками гемостаза и имеют множественные иммунорегуляторные функции, связывающие коагуляцию и воспаление. Становится очевидным, что активация тромбоцитов может быть биомаркером активности аутоиммунных заболеваний кожи. Множество соединений, находящихся в обращении, таких как IC, DAMP, VWF и коллаген, могут стимулировать непрерывную активацию тромбоцитов. Активация тромбоцитов, по-видимому, дополнительно усиливается отложением факторов комплемента на их поверхности. Тем не менее, необходимо изучить дополнительные подробности о перекрестных помехах между тромбоцитами и комплементом. После активации тромбоциты высвобождают различные провоспалительные медиаторы, такие как sCD40L, P-селектин, серотонин, PDGFs и TGF-β. Эти высвобождаемые факторы способствуют иммунному ответу, что в конечном итоге приводит к хроническому воспалению и локальному повреждению тканей. Активированные тромбоциты модулируют функцию врожденной и адаптивной иммунной системы путем секреции иммунных медиаторов или посредством прямого клеточного взаимодействия с иммунными клетками, такими как DC, нейтрофилы, B и T-клетки. Однако взаимодействие тромбоцитов с другими иммунными клетками, такими как тучные клетки и моноциты, требует дальнейшего выяснения. Также было бы целесообразно исследовать новые биомаркеры, полученные из тромбоцитов, для прогнозирования и оценки состояния соответствующего заболевания. Все еще существуют некоторые противоречия в оценке обычно измеряемого MPV при аутоиммунных заболеваниях. Противоречивые результаты предполагают, что только измерения MPV не достаточны для оценки функции тромбоцитов. Активация тромбоцитов является переменным и динамичным процессом, и исследования, посвященные роли тромбоцитов в аутоиммунном заболевании, не должны ограничиваться отдельными процессами активации тромбоцитов или различными факторами, выделяемыми тромбоцитами. В настоящее время сообщается, что нацеливание на тромбоциты с использованием моноклональных антител против CD40L и ингибиторов рецепторов ADP снижает аутоиммунные реакции в нескольких клинических исследованиях, посвященных аутоиммунным заболеваниям. Лучшее понимание роли тромбоцитов в аутоиммунных заболеваниях откроет новые терапевтические возможности в будущем.
Comments
Так и не поняла при васкулите снижается или повышается уровень тромбоцитов
Добавить комментарий